Glicopéptidos fluorescentes: síntese e caracterização

Abstract

O objectivo deste trabalho consistiu na síntese de N-glicopéptidos fluorescentes com potencial actividade biológica. Inicialmente preparou-se uma glucosilamina a qual foi ligada a corantes, aminoácidos e a péptidos pela posição anomérica, originando uma ligação amida entre o açúcar e o grupo carboxílico do composto a ligar. Sintetizou-se o péptido Gly-Phe-Pro por síntese sequencial e foram ainda feitas tentativas de preparação de um glicopéptido fluorescente por síntese convergente. Como unidades fluorescentes utilizaram-se os corantes ácido 4-(nafto[1,2-d] [1,2,3]triazol-2-il)benzóico e o ácido cumarina-3-carboxílico, anteriormente estudados pelo nosso grupo de investigação, que foram ligados à glucosilamina, à glicina ou à extremidade glicina do péptido Gly-Phe-Pro. Foi realizada a desprotecção do açúcar ligado aos fluoróforos e também quando ligado a péptidos fluorescentes por um método catalítico em condições moderadas. A formação da ligação amida foi realizada em solução por métodos convencionais usados em síntese peptídica. Na pesquisa de novos fluoróforos foram feitos estudos com corantes vinilsulfónicos tendo sido sintetizado um composto pela ligação de um corante deste tipo à cisteína. Foram realizadas reacções de aza-Michael com a metilvinilsulfona comercial e com um precursor de um corante vinilsulfónico. Os compostos foram purificados por cromatografia em coluna e/ou recristalização e caracterizados pelas técnicas analíticas habituais.

The aim of this work was the synthesis of fluorescent N-glycopeptides with potential biological activity. The project began with the synthesis of a glucosylamine that was used to perform amide linkage by the anomeric position with a carboxylic group from dyes, amino acids or peptides. The tripeptide Gly-Phe-Pro was synthesised by sequential approach. Several attempts were carried out in order to prepare a fluorescent glycopeptide by convergent synthesis methodology. 4-(naphtho[1,2-d] [1,2,3]triazol-2-yl)benzoic and cumarine-3-carboxylic acids were used as fluorophores. These compounds were previously studied by our research team. In the present work they were reacted with the glucosylamine mentioned above, with glycine and with Gly-Phe-Pro by the glycine unit. Removal of the acetyl groups from sugar moiety was carried out by a catalytic method under mild conditions. All reactions involving the formation of an amide bond were performed using the conventional methods of peptide synthesis. Some studies were done using vinyl sulphonic dyes. A new compound was prepared by reaction with cysteine. Several products were prepared by aza-Michael reactions using methyl vinyl sulphone and a precursor of a vinyl sulphonic dye as acceptors. All new compounds were purified by column chromatography and/or recrystallisation and fully characterized by the usual analytical techniques.