Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/1822/27819

TitleEstabelecimento de uma metodologia de cultura in vitro visando a limpeza de infecções virais de material clonal de populações de Allium sativum L.
Author(s)Silva, Isabel Gomes da
Advisor(s)Reis, Aida
Cunha, Ana
KeywordsAllium sativum
Potyvirus
Carlavírus
Tospovirus
Cultura de tecidos
Quimioterapia
Termoterapia
Bioensaio
Microscopia electrónica de transmissão
Tissues culture
Thermotherapy
Chemotherapy
Bioassay
Transmission electron microscopy
Issue date2013
Abstract(s)O género Allium encontra-se distribuído por todo o mundo e é de grande importância económica. O alho (Allium sativum L.) é a segunda espécie mais importante deste género tanto pelo seu uso na dieta humana, como pelas suas propriedades terapêuticas. Um dos principais problemas que afectam a produtividades desta cultura e a qualidade do bolbo são as doenças virais sistémicas. Associações de vírus pertencentes aos géneros Potyvirus – Onion yellow dwarf virus e Leek yellow stripe virus - e Carlavirus – Garlic common latent virus e Shallot latent virus – são responsáveis pela doença designada por mosaico do alho. Devido a esta associação, a identificação individual de cada espécie de vírus presente na planta torna-se difícil. Outro vírus que afecta a cultura de A. sativum é o Tomato spotted wilt virus (TSWV). Este vírus pertence ao género Tospovírus e foi identificado pela primeira vez numa cultura do tomate na década de 1920. Com o objectivo de estabelecer uma metodologia de cultura in vitro a partir de material clonal de populações de A. sativum que proporcionasse uma elevada multiplicação de plantas isentas de infecções virais, testaram-se duas técnicas de cultura de tecidos - a cultura de meristemas e a cultura de discos basais - associadas a dois tratamentos antivirais - a termoterapia e/ou a quimioterapia. O material propagativo para o estabelecimento da cultura in vitro de A. sativum foi sujeito a temperaturas de 37 ou 45 °C e à presença ou ausência da ribavirina. O efeito dos tratamentos foi avaliado no desenvolvimento das plantas regeneradas e através de bioensaio usando extractos isolados destas plantas em espécies indicadoras específicas para as principais estirpes virais de A. sativum – alho-porro (Allium porrum L.) e alface (Lactuca sativa L.). A termoterapia e/ou a quimioterapia associada à cultura de tecidos, na generalidade, demonstraram ter influência sobre o número de plantas regeneradas e sobre o desenvolvimento das plantas em cultura in vitro, dependendo do genótipo da cultivar, entre outros factores. O diagnóstico das folhas recolhidas das plantas obtidas pela cultura in vitro foi realizado por microscopia electrónica de transmissão, sendo que, devido à morfologia isométrica, as partículas virais da espécie TSWV, quando presentes, foram as de mais fácil detecção.
Widely distributed, the genus Allium has always had a great economic significance. This genus contains hundreds of distinct species but garlic (Allium sativum L.) is the second most important due to its therapeutic properties and its use in the human diet. Several factors adversely affect the productivity of A. sativum and the quality of its bulbs, but the main problems are consequence of viral systemic diseases. A virus complex consisting of two Potyviruses, Onion yellow dwarf virus and Leek yellow stripe virus, and two Carlaviruses, Garlic common latent virus and Shallot latent virus , is responsible for the disease designated as mosaic disease of garlic. This viral complex makes it difficult to separate and determine single virus species in the plant. Another virus infecting Allium crop is the Tomato spotted wilt virus (TSWV). This Tospovirus was first detected in tomato in the 1920s. Two different techniques of tissues culture have been used with the single purpose of establishing an in vitro culture from clonal material of A. sativum populations with high multiplication rates of regenerated healthy material - the meristem culture and the stem disc culture – both associated to thermotherapy and chemotherapy. The propagation material for the establishment of the in vitro culture of the A. sativum was subject to temperatures of 37 ºC or 45 ºC and to the presence or absence of ribavirin. The effects of the treatment were evaluated through the analysis of the development of the regenerated plants and by a bioassay using isolated extracts of these plants in indicator species for the A. sativum most common virus species – leek (Allium porrum L.) and lettuce (Lactuca sativa L.). Thermotherapy and/or chemotherapy associated to the tissue culture have demonstrated to have an influence in the number of regenerated plants and in the development of the plants cultivated in vitro, depending on cultivar genotype among other facts. The leaves collected from the plants grown in vitro were diagnosed using a transmission electron microscope bearing in mind that due to the isometric morphology, the TSWV viral particles were easier to detect.
TypeMaster thesis
DescriptionDissertação de mestrado em Biologia Molecular, Biotecnologia e Bioempreendedorismo em Plantas
URIhttp://hdl.handle.net/1822/27819
AccessOpen access
Appears in Collections:BUM - Dissertações de Mestrado
DBio - Dissertações de Mestrado/Master Theses

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