Dispositivo para determinação do tipo de sangue humano : aplicação aos fenótipos Rh e teste reverso

Abstract

A tipagem sanguínea é um teste clínico indispensável e de extrema importância antes de qualquer processo de transfusão. Casos de incompatibilidade sanguínea podem provocar complicações graves, ou mesmo levar à morte do paciente. Atualmente, a classificação do tipo de sangue, é um processo moroso e por conseguinte não é realizado em situações de emergência, administrando-se sangue O negativo uma vez que é o menos suscetível de criar complicações e ou incompatibilidades. O processo de tipagem sanguínea baseia-se na deteção de anticorpos e/ou antigénios presentes no sangue. Este pode ser realizado por métodos manuais que fornecem uma resposta rápida e in situ, contudo, possuem alguma subjetividade uma vez que a classificação depende da inspeção visual do técnico que efetua o teste. Para obviar essa subjetividade surgiram os métodos automáticos, contudo, são demorados (aproximadamente 30 minutos), dispendiosos e dificilmente possibilitam medições in situ. Por estes motivos propõe-se neste trabalho de dissertação, o desenvolvimento de um dispositivo que concilie as diferentes vantagens dos métodos atualmente existentes, sem acarretar as desvantagens referidas. O dispositivo desenvolvido utiliza o princípio da deteção de aglutinação em misturas de amostras de sangue com determinados reagentes através de técnicas espectrofotométricas. O dispositivo compreende dois métodos de tipagem sanguínea, a deteção de antigénios e a deteção de anticorpos. Assim, efetua tanto os testes diretos como os testes reversos (ou testes de confirmação) obtendo-se tipagens sem subjetividade em menos de 5 minutos. Foi ainda introduzido no aparelho, o teste cruzado (cross-matching) que determina, imediatamente antes de se efetuar uma transfusão sanguínea, se o sangue do paciente é compatível com o sangue do dador. Para as tipagens de antigénios, o aparelho determina o tipo ABO completo e o fenótipo Rh (nomeadamente os antigénios D, C, c, E e e). Para o teste reverso, o dispositivo faz a deteção dos anticorpos plasmáticos do sistema ABO. A sua portabilidade, medições in situ, rapidez de análise eliminando a subjetividade, assim como o seu baixo custo permitem que seja utilizado em qualquer local, como por exemplo, em unidades de emergência médica, em blocos operatórios para a confirmação imediata de compatibilidade sanguínea antes da transfusão, e em países subdesenvolvidos, onde a tipagem sanguínea é um processo poucas vezes utilizado.

Blood typing is an indispensable and extremely important test before any blood transfusion. In case of blood incompatibility, the patient may suffer serious clinical risks and, in extreme cases, he/she could die. Nowadays, blood typing is a process that takes time, therefore it can’t be done in emergency situations. Thus, the patient is administered with O negative blood, since it is the universal donor blood type, causing fewer complications and incompatibilities. Blood determination is achieved by detecting antibodies and antigens in the blood. It could be performed with manual tests, which have the advantages of being quick and portable, but they have some subjectivity related to the technician who performed the test. To overstep this disadvantage, there are the automatic systems that allow to obtain most accurate and nonsubjective results. Nevertheless they have some disadvantages such as the high cost and response time, and the portability. Given these problems, it was proposed to develop an automated device that reunite the advantages of the manual and automated tests, but without tje disadvantages previously described. The device is based on the detection of the interaction between blood samples and some specific reagents (agglutination reaction) with a spectrophotometric approach. The device has the capability to perform direct and reverse tests, giving accurate results in less than 5 minutes. Moreover, it was introduced another proceeding to the device called cross-matching. With the cross-matching test it is possible to know, right before any transfusion, if the patient blood type is compatible with the donor blood type. In the direct typing, the device is able to determine the complete ABO blood group and the Rh phenotype (including the antigens D, C, c, E and e). In the reverse typing, it is possible to determine the antibodies of the ABO blood group. So, the device combines several advantages like its portability, the capability to perform in situ tests, its low cost and its capacity to obtain accurate results in a short time. Combining these advantages, the device becomes blood typing possible in mobile emergency units, operating rooms (to do the last confirmation with the cross-matching test) and in underdeveloped countries where the blood typing process is rarely used.